世界提高抗微生物药物认识周 | 肺炎支原体实验室检测方法
肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）是我国5岁及以上儿童最主要的社区获得性肺炎(community acquired pneumonia，CAP)。一年四季均可感染，但多发于秋冬季。今年入冬以来，我国多地出现儿童肺炎支原体感染病例，引起人们极大的关注。肺炎支原体肺炎的主要临床表现为发热、咳嗽，可伴有头痛、流涕、咽痛、耳痛等，与其他类型的呼吸道感染相似。因此，明确诊断尤为重要。肺炎支原体实验室检测为支原体肺炎的诊断提供支持性证据。
1. 肺炎支原体培养
诊断支原体感染的“金标准”，通常是使用咽拭子或痰液样本进行培养。肺炎支原体的生长速度较慢，可能要几周时间才能观察到生长，在培养过程中，还需要一些特殊的条件，比如一定浓度的二氧化碳等。所以，该方法很难用于临床常规诊断。
支原体典型的“煎蛋”菌落
2. 肺炎支原体核酸检测
应用聚合酶链反应（PCR）技术检测肺炎支原体的DNA或RNA，该方法在敏感性和特异性上有显著优势，特别是在早期感染时具有诊断价值。但核酸检测的准确性依赖于样本的质量和检测过程的严格控制，确诊肺炎支原体肺炎时也需要结合临床症状和其他检测结果综合判断。
3. 肺炎支原体抗体测定
血清学检测方法，医生可以通过这种检测，确定体内针对肺炎支原体的特异性抗体水平，从而判断是否发生过感染。
人体内对于病原体产生的抗体一般有IgM、IgA、IgG三种类型，IgM抗体最早产生，一般在感染后4-5天出现，可作为早期感染的诊断指标；IgG抗体在感染后晚期出现，通常在感染后2-3周达到峰值，IgG抗体的高水平可能表示近期或既往存在感染；IgA型抗体是一种分泌型抗体，多存在于粘膜组织中，血中也有少量存在。通常情况下，医生会同时测量IgM和IgG抗体，这样可以更加全面地了解感染的时间线和状态。
专业知识延申
肺炎支原体抗体的检测方法
颗粒凝集法
这种方法通过观察抗体与抗原结合后引起的颗粒凝集来检测抗体，通常用于快速筛查，是实验室测定血清肺炎支原体IgM抗体的主要方法，单份血清抗体滴度≥1:160可以作为肺炎支原体近期感染的标准；
酶联免疫吸附试验（ELISA）
利用特定的抗原与患者血清中的抗体结合，然后通过酶标记的二抗和底物反应产生颜色变化，从而进行定量分析。测定IGM、IGA、IgG等亚类抗体的酶联免疫吸附法、化学发光法对诊断肺炎支原体感染也有价值，但阳性折点国内尚无统一标准；
免疫胶体金法
可定性检测IgM抗体，阳性提示肺炎支原体感染，适合门急诊患儿快速筛查，但也可出现假阳性，抗体检测结果务必结合临床和影像学特征综合分析。
间接免疫荧光法（IFA）
样本血清与包被肺炎支原体抗原的组织膜片反应，再加入荧光染料标记的二抗，在荧光显微镜下观察，如果存在特定抗体，会看到荧光信号，此方法适用于初筛。
临床实验室中支原体检测还是以快速检测和定量检测为主，肺炎支原体抗体检测最简便、最常用，核酸检测更好，支原体培养是“金标准”。每种方法都有各自的局限性，在选择检测方法时，要考虑到检测目的、所需的灵敏度和特异性，分析结果时要考虑检测方法学的限制性。检测方法间各有优势相互补充，需要合理而选择性应用。
参考文献
[1] 中华人民共和国国家卫生健康委员会.儿童肺炎支原体肺炎诊疗指南（2023年版）.
出品：临床检测中心 田志颖
图片：来源于网络
编辑：张雅楠 牟琳琬
审核：朱国庆 董源